Некоторые экологические особенности, которые отличают майник двулистный от других видов растений:

• Отношение к освещённости: майник двулистный — теневыносливый вид, произрастает в условиях полутени, изредка встречается при полном свете. 15
• Отношение к влажности почвы: индикатор средневлажных почв, отсутствует на влажной и сухой почве. 1
• Отношение к кислотности почвы: обитает преимущественно на кислых почвах (от слабокислых до сильнокислых). 1
• Отношение к фактору урбанизации: умеренный урбанофоб, обитает преимущественно вне поселений людей. 1
• Отношение к питанию: мезотроф. 3
• Место обитания: растёт в сосновых и смешанных лесах, на лесных полянах. 2