Какие существуют методы определения последовательности аминокислот в белке?

Некоторые методы определения последовательности аминокислот в белке:

• Метод Эдмана. elearning.volgmed.ru kochem.ssau.ru К аминогруппе Ν-концевой α-аминокислоты присоединяют фенилизотиоцианат (ФИТЦ). kochem.ssau.ru В результате взаимодействия с ФИТЦ с N-концевой аминокислотой полипептида образуется фенилтиогидантионовое производное, которое избирательно гидролизуется без повреждения других пептидных связей. elearning.volgmed.ru После реакции выделяют комплекс ФИТЦ-АК1 и идентифицируют его. elearning.volgmed.ru
• Метод Акабори. elearning.volgmed.ru Это химический метод, который основан на гидразинолизе полипептида в безводной среде при 100 °С. elearning.volgmed.ru Гидразин, вызывая распад чувствительных к нему пептидных связей полипептида, реагирует со всеми аминокислотами, за исключением С-концевой аминокислоты, поскольку её карбоксильная группа не участвует в образовании пептидной связи. elearning.volgmed.ru
• Метод с применением карбоксипептидазы. elearning.volgmed.ru Обработка полипептида карбоксипептидазой, которая разрывает пептидную связь с того конца пептида, где содержится свободная СООН-группа, приводит к освобождению С-концевой аминокислоты, природа которой может быть идентифицирована методом хроматографии. elearning.volgmed.ru
• Метод пептидных карт. kochem.ssau.ru Смесь пептидов наносится в виде полоски на лист хроматографической бумаги или на пластинку с тонким слоем целлюлозы и подвергается двумерной хроматографии или двумерному электрофорезу. kochem.ssau.ru После «проявления» пептидной карты образуется набор пятен с определённым взаимным расположением, характерный для данного белка. kochem.ssau.ru