Как можно получить каллус из фрагментов растений в лабораторных условиях?

Чтобы получить каллус из фрагментов растений в лабораторных условиях, нужно выделить кусочек ткани (эксплант), стерилизовать его и перенести на искусственную питательную среду. www.ektu.kz Она должна содержать минеральные соли, органические вещества и фитогормоны. www.ektu.kz

Пример метода получения каллуса из сердцевины стебля взрослого растения табака: www.ektu.kz

1. Из стеблей табака в фазе бутонизации или цветения вырезают участки с хорошо развитой, но ещё не одревесневевшей сердцевиной (второе-третье междоузлие). www.ektu.kz
2. Выбранные участки стебля разрезают на части длиной 5 см и моют в мыльном растворе щёткой, затем отмывают от мыла водопроводной водой и ополаскивают дистиллированной водой. www.ektu.kz
3. Чистые участки стебля помещают в стакан с дистиллированной водой и переносят в ламинар. www.ektu.kz
4. Для стерилизации стебли протирают 96%-ным спиртом и погружают в марлевых мешочках в 0,1%-ный водный раствор сулемы на 10–15 минут или в раствор диацида (1:1000) на 25 минут. www.ektu.kz
5. После стерилизации стебли промывают в пяти порциях дистиллированной воды, оставляя в каждой на 5 минут. www.ektu.kz
6. Затем из центральной части стебля вырезают стерильным сверлом для пробок (диаметр 5 мм) столбик сердцевиной ткани и помещают в стерильную чашку Петри. www.ektu.kz
7. Стерильным скальпелем удаляют участки ткани вблизи прежних срезов (концевые участки). www.ektu.kz Вырезанная сердцевина не должна содержать элементов флоэмы и камбия. www.ektu.kz
8. Полученные цилиндрики сердцевины разрезают скальпелем в чашке Петри на кусочки длиной 2–3 мм и помещают на поверхность агаровой среды. www.ektu.kz
9. Посуду с эксплантами табака помещают в термостат (в темноту) при температуре +25 °С для культивирования. www.ektu.kz
10. Через три недели анализируют результаты по образованию каллуса. www.ektu.kz

Таким же образом получают каллус из корнеплодов картофеля и моркови. www.ektu.kz

Обязательным условием получения каллуса в лабораторных условиях является присутствие в питательной среде двух фитогормонов: ауксинов и цитокининов. prepod.nspu.ru